A biotina (também conhecida como vitamina H) é um composto heterocíclico não aromático com uma cauda de 4-carboxibutila. Uma variedade de derivados de biotina estão disponíveis nos quais a porção de biotina está conectada (através do grupo 4-carboxibutila) a uma molécula de ligação que pode ser ligada diretamente a um oligonucleotídeo.
Os oligonucleotídeos marcados com biotina podem ser usados para ligar o oligonucleotídeo a conjugados de estreptavidina-proteína, colunas de afinidade de estreptavidina ou estreptavidina marcada. A GenOne oferece três rótulos diferentes de biotina.
A porção de biotina pode ser ligada ao oligo através de um espaçador de 8 átomos (Biotina-ON), um espaçador de 15 átomos (Biotina-TEG) ou um resíduo de timidina (Biotina-dT). A biotina pode ser ligada à extremidade 5 ', à extremidade 3' ou pode ser usada internamente dentro de uma sequência. A ligação de uma molécula de biotina ao terminal 3 'também pode ser usada para prevenir a digestão da exonuclease 3' e a extensão 3 'durante as reações de amplificação. A biotina usada para a marcação 3'- é uma Biotina C3 ou 3'-Biotina-TEG.
Para marcação interna, é usada Biotina-dT (um resíduo de timidina modificado com biotina que pode ser usado internamente no lugar da timidina).
A biotina está ligada ao dT por meio de um braço espaçador de 10 átomos.
Se a biotina deve ser removida do DNA após a captura do DNA marcado com biotina com esferas de estreptavidina ou anexando o DNA modificado a uma superfície, o uso de Biotina-PC é recomendado. A biotina pode ser clivada da molécula de DNA iluminando com uma fonte de luz ultravioleta portátil.
Devido à baixa eficiência de acoplamento da Biotina, a purificação dos oligos marcados com biotina é altamente recomendada.
Biotin dT (5' - internal)
Biotin ON (5' - internal)
Biotin TEG (5' - internal)
Biotin (5')
Biotin PC (5')