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COVID-19

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REAGENTES SENDO ENVIADOS EM REGIME DE URGÊNCIA

Kit de detecção de Sars-nCov-19 por amplificação Isotérmica

Detecção de Sars-nCov-19 por amplificação isotermal a partir de 5 minutos por RPA (Recombinase Polymerase Amplification ).

Preparo da reação em 5 minutos e detecção em amostras com alto número de cópias a partir de 5 minutos. Pode ser utilizado em qualquer equipamento que faça incubação de microtubos de 0,2mL e faça leituras de fluorescência no canal FAM.

Acesse aqui o protocolo em português: Covid-19 Detection Kit Protocol-V1-PT-BR.pdf


Primers e sondas para COVID-19 utilizado em diversas regiões do mundo de acordo com a OMS

https://www.who.int/emergencies/diseases/novel-coronavirus-2019/technical-guidance/laboratory-guidance

 

Preços 04/2020*:

Tipo

Preço

Escala de Síntese

Rendimento Mínimo Garantido

Primer Dessalinizado

Sob Consulta

200nmol

50nmol

Sonda Dessalinizada

FAM/HEX-BHQ1

Sob Consulta

200nmol

50nmol

Primer HPLC

Sob Consulta

200nmol

25nmol

Sonda HPLC

FAM/HEX-BHQ1

Sob Consulta

200nmol

25nmol

Preços de referência, para orçamento formal por favor entrar em contato.

 

CDCPrimers e sondas indicados pelo CDC (Atlanta, Georgia) para uso nos EUA:

Nome de Primer/Sonda

Sequência de DNA (5′ – 3′)

Conc. na
reação

2019-nCoV_Nl-F 

GACCCCAAAATCAGCGAAAT

500 nM

2019-nCoV_Nl-R 

TCTGGTTACTGCCAGTTGAATCTG

500 nM

2019-nCoV_Nl-P 

FAM-ACCCCGCATTACGTTTGGTGGACC-BHQ1

125 nM

2019-nCoV_N2-F 

TTACAAACATTGGCCGCAAA

500 nM

2019-nCoV_N2-R 

GCGCGACATTCCGAAGAA

500 nM

2019-nCoV_N2-P 

FAM-ACAATTTGCCCCCAGCGCTTCAG-BHQ1

125 nM

2019-nCoV_N3-F 

GGGAGCCTTGAATACACCAAAA

500 nM

2019-nCoV_N3-R 

TGTAGCACGATTGCAGCATTG

500 nM

2019-nCoV_N3-P 

FAM-AYCACATTGGCACCCGCAATCCTG-BHQ1

125 nM

Hs.RNAse P Forward

AGATTTGGACCTGCGAGCG

500 nM

Hs.RNAse P Reverse

GAGCGGCTGTCTCCACAAGT

500 nM

Hs.RNAse P Probe

FAM-TTCTGACCTGAAGGCTCTGCGCG-BHQ1

125 nM

Atualmente, estão usando somente N1, N2 e RP.

O ensaio Hs.RNAseP tem como alvo o RNA de um gene humano e serve de controle interno para extração de RNA e transcrição reversa.

Primers e sondas usados na Alemanha:

Nome de Primer/Sonda

Sequência de DNA (5′ – 3′)

Conc. na
reação

Assay 1 (RdRRP)

RdRP_SARSr-F2 

GTGARATGGTCATGTGTGGCGG

600 nM

RdRP_SARSr-R1 

CARATGTTAAASACACTATTAGCATA

800 nM

RdRP_SARSr-P2

FAM-CAGGTGGAACCTCATCAGGAGATGC-BHQ1

100 nM

A sonda acima é específica
para 2019-nCoV, não detectará SARS-CoV

Assay 2 (gene E) (conjunto idêntico ao utilizado na França)

E_Sarbeco_F1 

ACAGGTACGTTAATAGTTAATAGCGT

400 nM

E_Sarbeco_R2 

ATATTGCAGCAGTACGCACACA

400 nM

E_Sarbeco_P1 

FAM-ACACTAGCCATCCTTACTGCGCTTCG-BHQ1

200 nM

Assay 3 (N gene), veja https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6988269/

N_Sarbeco_F

CACATTGGCACCCGCAATC

600 nM

N_Sarbeco_R

GAGGAACGAGAAGAGGCTTG

800 nM

N_Sarbeco_P

FAM-ACTTCCTCAAGGAACAACATTGCCA-BHQ1

200 nM

 

Primers Paris COVID-19Primers e sondas utilizados na França (Institut Pasteur, Paris):

Nome de Primer/Sonda

Sequência de DNA (5′ – 3′)

Conc. na
reação

RdRp gene / nCoV_IP2

nCoV_IP2-12669Fw 

ATGAGCTTAGTCCTGTTG

400 nM

nCoV_IP2-12759Rv 

CTCCCTTTGTTGTGTTGT

400nM

nCoV_IP2-12696bProbe

HEX-AGATGTCTTGTGCTGCCGGTA-BHQ1

160 nM

RdRp gene / nCoV_IP4

nCoV_IP4-14059Fw 

GGTAACTGGTATGATTTCG

400 nM

nCoV_IP4-14146Rv 

CTGGTCAAGGTTAATATAGG

400 nM

nCoV_IP4-14084Probe(+) 

FAM-TCATACAAACCACGCCAGG-BHQ1

160 nM

E gene/E_Sarbeco (conjunto idêntico ao utilizado na Alemanha)

E_Sarbeco_F1 

ACAGGTACGTTAATAGTTAATAGCGT

400 nM

E_Sarbeco_R2 

ATATTGCAGCAGTACGCACACA

400 nM

E_Sarbeco_P1 

FAM-ACACTAGCCATCCTTACTGCGCTTCG-BHQ1

200 nM

China COVID-19Primers e sondas usados na China (新型冠状病毒核酸检测引物和探针序列):

Nome de Primer/Sonda

Sequência de DNA (5′ – 3′)

Conc. na
reação

Target 1 (ORF1ab):

正向引物 ORF1ab(F)

CCCTGTGGGTTTTACACTTAA

500 nM

反向引物 ORF1ab(R)

ACGATTGTGCATCAGCTGA

500 nM

荧光探针 ORF1ab(P)

FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG-BHQ1

150 nM

Target 2 (N):

正向引物 N(F)

GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT

500 nM

反向引物 N(R)

CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG

500 nM

荧光探针 N(P)

FAM-TTGCTGCTGCTTGACAGATT-BHQ1

150 nM

 

Primers e sondas usados em Hong Kong:

Nome de Primer/Sonda

Sequência de DNA (5′ – 3′)

Conc. na
reação

Assay 1 (Target: ORF1b-nsp14)

HKU-ORF1b-nsp14F

TGGGGYTTTACRGGTAACCT

500 nM

HKU- ORF1b-nsp14R

AACRCGCTTAACAAAGCACTC

500 nM

(HKU-ORF1b-nsp141P

FAM-TAGTTGTGATGCWATCATGACTAG-BHQ1

250 nM

Assay 2 (Target: N)

HKU-NF

TAATCAGACAAGGAACTGATTA

500 nM

HKU-NR

CGAAGGTGTGACTTCCATG

500 nM

HKU-NP

FAM-GCAAATTGTGCAATTTGCGG-BHQ1

250 nM

japanPrimers e sondas usados no Japão:

Nome de Primer/Sonda

Sequência de DNA (5′ – 3′)

Conc. na
reação

1) ORF1a set (PCR regular, não é real-time PCR)

NIID_WH-1_F501 (S)

TTCGGATGCTCGAACTGCACC

500 nM

NIID_WH-1_R913 (AS) 

CTTTACCAGCACGTGCTAGAAGG

500 nM

NIID_WH-1_F509 (S) 

CTCGAACTGCACCTCATGG

500 nM

NIID_WH-1_R854 (AS) 

CAGAAGTTGTTATCGACATAGC

500 nM

NIID_WH-1_Seq_F519 (S) 

ACCTCATGGTCATGTTATGG

500 nM

NIID_WH-1_Seq_R840 (AS) 

GACATAGCGAGTGTATGCC

500 nM

2)S set (PCR regular,não é real-time PCR)

WuhanCoV-spk1-f (S) 

TTGGCAAAATTCAAGACTCACTTT

500 nM

WuhanCoV-spk2-r (AS) 

TGTGGTTCATAAAAATTCCTTTGTG

500 nM

NIID_WH-1_F24381 (S) 

TCAAGACTCACTTTCTTCCAC

500 nM

NIID_WH-1_R24873 (AS) 

ATTTGAAACAAAGACACCTTCAC

500 nM

NIID_WH-1_Seq_F24383 (S) 

AAGACTCACTTTCTTCCACAG

500 nM

NIID_WH-1_Seq_R24865 (AS) 

CAAAGACACCTTCACGAGG

500 nM

3)Primers and probes for real-time RT-PCR

NIID_2019-nCOV_N_F2 

AAATTTTGGGGACCAGGAAC

500 nM

NIID_2019-nCOV_N_R2 

TGGCAGCTGTGTAGGTCAAC

700 nM

NIID_2019-nCOV_N_P2 

FAM-ATGTCGCGCATTGGCATGGA-BHQ1

200 nM

 

Primers e sondas usados na Tailândia

Nome de Primer/Sonda

Sequência de DNA (5′ – 3′)

Conc. na
reação

WH-NIC N-F 

CGTTTGGTGGACCCTCAGAT

1000 nM

O primer acima sobrepõe parcialmente ao utilizado pela sonda CDC 2019-nCoV_Nl-P

WH-NIC N-R 

CCCCACTGCGTTCTCCATT

1000 nM

WH-NIC N-P 

FAM-CAACTGGCAGTAACCA-BHQ1

250 nM

 

Fluoróforos e Quenchers Oferecidos:

Há laboratórios multiplexando os ensaios, com marcações com FAM e HEX, porém é preciso fazer ajustes no master
mix e concentração de primers.

 

Fluoróforos

Quenchers

     

BHQ1

BHQ2

BHQ3

MGB

TAMRA

Fluorescein

x

     

x

6-FAM

x

   

x

x

VIC-Repl.

x

       

HEX

x

       

TET

x

       

NED-Repl.

 

x

     

LIZ-Repl.

 

x

     

PET-Repl.

 

x

     

ROX-Repl.

 

x

     

Cy3

 

x

     

Cy3.5

 

x

     

Cy5

 

x

     

Cy5.5

x

       

TAMRA

 

x

     

Texas Red-Repl.

 

x

     

D3-repl.

   

x

   

D4-repl.

   

x

   

IRD700

   

x

   

Quasar 705

   

x

   

Redmond Red

 

x

     

YakimaYellow

x

       

 

 

Controle positivo para reações de PCR:

 

Construção em mini plasmídiocontendo as regiões alvo de todos os ensaios de PCR em tempo real listados
acima, as regiões não amplificáveis pelos ensaios listados foram modificadas para evitar expressão de qualquer proteína viral.

Entregue liofilizado em alíquotas equivalentes a 200 mil de cópias/µL quando ressuspenso em 1mL de ddH2O. Uma recomendação geral de utilização é de aplicar 5µL do controle à 200 cópias/µL (1 mil cópias).

Útil para garantir o funcionamento dos primers e sondas.

Como se trata de um plasmídeo, a eficiência em relação ao RNA viral natural, ou segmento de RNA sintético pode ser diferente.

 

Vetores para Expressão de Proteínas do Novo Coronavírus SARS-CoV-2 COVID 19:

Possuímos plasmídeos sintéticos pET28a(+) com as sequências de proteínas do SARS-Cov-2, genoma de referênciaNC_045512.2 otimizadas para expressão em E.coli, com cauda poli-His para purificação e sítio de clivagem de protrombina.

Ainda podemos oferecer qualquer outro tipo de construção que precisarem, quer seja em vetores de clonagem ou expressão enviado pelo cliente ou que possuímos em estoque.

 

Proteína

Sequência de Referência

Mapa do vetor

M – membrane glycoprotein

YP_009724393.1

E – envelope protein

YP_009724392.1

S – surface glycoprotein

YP_009724390.1

RdRP – RNA-dependent RNA polymerase

YP_009725307.1

nsp16_OMT – 2′-O ribose methyltransferase

YP_009725311.1

endoRNAse

YP_009725310.1

3C-like proteinase

YP_009725301.1

 

Todos os reagentes listados nessa página têm seu uso dedicado para pesquisa científica.

A aplicação de qualquer um desses reagentes para fins de diagnóstico só é permitido somente após a validação como método próprio (in house), seguindo a legislação vigente (RDC 302/2005 e à nota técnica conjunta no. 001/2016 GEVIT/GGTPS/Anvisa e Grecs/GGTES/Anvisa) e manual da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica acessado neste link:

http://www.sbpc.org.br/wp-content/uploads/2018/09/ListaDeOrientacaoEmDiagnosticoMolecular2018.pdf

Novidade! Proteínas Recombinantes para entrega a partir de 2 semanas.

COVID-19 recombinant protein, HEK293 expressed, high pure.

Molécula

Recombinante

Cat #

Descrição

Estrutura Molecular

Tam P

Tam G

Pureza Testada

Atividade Testada

COVID-19 Spike Glycoprotein
(GenBank ID: QHD43416.1, 1273AA)

S

WB-SPN-S52H5

S protein (R667A), His Tag

S (14-R667A-1195)-His

100ug

1mg

95% SDS-PAGE

ACE2 binding via ELISA

WB-SPN-C52H4

S protein (R683A,R685A), His Tag

S (16-R683A-R685A-1213)-His

100ug

1mg

85% SDS-PAGE

ACE2 binding via ELISA

S1 

WB-S1N-C52H4

S1 protein, His Tag (SEC-MALS Pure)

S1 (16-685)-His

100ug

1mg

90% SDS-PAGE/SEC-MALS

ACE2 binding via ELISA

WB-S1N-C52H3

S1 protein, His Tag

S1 (16-685)-His

100ug

1mg

90% SDS-PAGE

ACE2 binding via ELISA

WB-S1N-C5255

S1 protein, Fc Tag

S1 (16-685)-Fc

100ug

1mg

90% SDS-PAGE

ACE2 binding via ELISA

WB-S1N-C82E8

S1 protein, His, Avitag Biotinylated (SEC-MALS Pure)

S1 (16-685)-His-Avi

25ug

200ug

90% SDS-PAGE/SEC-MALS

ACE2 binding via ELISA

WB-S1N-C5257

S1 protein, Mouse IgG2a Fc Tag

S1 (16-685)-mFc

100ug

1mg

90% SDS-PAGE

—

S-RBD
(receptor binding domain)

WB-SPD-C52H3

S-RBD, His Tag

S-RBD (319-541)-His

100ug

1mg

90% SDS-PAGE

ACE2 binding via ELISA

WB-SPD-C5255

S-RBD, Fc Tag (SEC-MALS pure)

S-RBD (319-541)-Fc

100ug

1mg

90% SDS-PAGE/SEC-MALS

ACE2 binding via ELISA

WB-SPD-C82E9

S-RBD, His, Avitag Biotinylated (SEC-MALS pure)

S-RBD (319-541)-His-Avi

25ug

200ug

90% SDS-PAGE/SEC-MALS

ACE2 binding via ELISA

S2

WB-S2N-C52H5

S2 protein, His Tag

S2 (686-1213)-His

100ug

1mg

90% SDS-PAGE

—

 COVID-19 nucleocapsid phosphoprotein
(NCBI Sequence YP_009724397.2)

NP

WB-NUN-C5227

Nucleocapsid protein, His (C-term)

Nuclecapsid protein (1-419)-His

100ug

1mg

95% SDA-PAGE

—

Angiotensin-converting enzyme 2
(UniProt ID : Q9BYF1-1)

ACE2-ECD
Extracellular Domain

WB-AC2-H52H8

ACE2-ECD, His Tag

His-ACE2(18-740)

50ug

1mg

90% SDS-PAGE/SEC-MALS

—

WB-AC2-H5257

ACE2-ECD, Fc Tag

ACE2(18-740)-Fc

50ug

1mg

90% SDS-PAGE/SEC-MALS

S.RBD binding via ELISA

WB-AC2-H82E6

ACE2-ECD, His, Avitag Biotinylated (SEC-MALS Pure)

ACE2(18-740)-His-Avi

25ug

200ug

90% SDS-PAGE/SEC-MALS

S/S1 binding via ELISA

WB-AC2-H82F9

ACE2-ECD, Fc, Avitag Biotinylated

ACE2(18-740)-Fc-Avi

25ug

200ug

90% SDS-PAGE

S.RBD binding via ELISA

 

 

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